2025年8月1日に、当社の研究成果が学術誌『Anticancer Research』に掲載されました。
アサイゲルマニウムと低濃度のリポ多糖（LPS）^（注1） を組み合わせると、培養細胞においてマクロファージ（白血球の一種）がM1型^（注2）に傾きやすくなり、異物を貪食どんしょくする働きが高まる可能性が示されました。
さらに、アサイゲルマニウムもしくはLPS単独の添加では約10日かかる当該変化に対して、併用では4日間で到達するという「時間の短縮」も示唆されました。

• 掲載誌：ANTICANCER RESEARCH
• 論文URL（DOI）：https://doi.org/10.21873/anticanres.17704
• タイトル：Combination of 3-(Trihydroxygermyl)propanoic Acid (THGP) and Lipopolysaccharide Promotes Macrophage Differentiation to M1, and Antitumor Activity
  （3-(Trihydroxygermyl)propanoic Acid（THGP^（注3））とリポ多糖の組み合わせは、マクロファージのM1型への分化を促進し、抗腫瘍活性を高める）
• 著者：JUNYA AZUMI, TOMOYA TAKEDA, YASUHIRO SHIMADA, HISASHI ASO, HIROYUKI INAGAWA, TAKASHI NAKAMURA

1．研究内容（概要）

• 白血球の一種であるマクロファージは、がん治療の分野で注目されている免疫細胞です。マクロファージは、主に、炎症促進性のM1型と、抗炎症性のM2型に分類されます。前者のM1型が、抗腫瘍効果を発揮します。
• 本研究は、アサイゲルマニウムが水に溶けた状態の化合物（THGP）と、低濃度のリポ多糖（LPS）の併用により、マクロファージ様細胞のM1型への分化が進み、抗腫瘍活性が高まるという相乗効果を確認しました。
• さらに、THGPとLPSの併用により、効果発現までの時間短縮が示唆されました。THGPとLPSの各単独では10日で到達する抗腫瘍活性の状態に、併用では4日目で到達しました。
• なお先行研究により、THGP はNF-κBを介した細胞内シグナルに作用し、LPS はTLR4を介した細胞表面シグナルに作用することが確認されています。両者のシグナルが異なるため、組み合わせによる相乗効果が想定されます。

2．方法

1) 形態変化の観察
RAW264.7細胞^（注4）（マクロファージ様細胞）に、THGP（500 µM）、LPS※（1 ng/mL）、「THGPとLPSの両成分」を添加し、4 日間培養して形態の変化を観察。
※Pantoea agglomerans由来

2) M1型分化の検討
M1マーカーであるCD80、CD86の遺伝子・タンパク質の発現をqPCR、ウェスタンブロット、免疫蛍光染色にて評価。

3) マクロファージから分泌されるサイトカインの検討
M1型が分泌するIL‑1β、IL‑6（サイトカイン）の遺伝子発現をqPCRにて評価。

4) 機能評価
① 異物貪食能：刺激したマクロファージによるFITCビーズ取り込み量の変化を評価。
② 抗腫瘍効果：B16‑F10 メラノーマ（がん細胞）に対する細胞傷害活性を、ルシフェラーゼアッセイにより評価。

5) 10日間刺激による総合評価
1)と同条件で10 日間培養し、1)-4)について評価。

3．結果

1) 形態変化の観察（図1）

• THGP単独：マクロファージの樹状突起が長くなりました。
• LPS単独：付着性のあるアメーバ様形態の割合が高くなりました。
• 併用：各単独時の特徴が併存しており、1日目・4日目の段階でM1型への分化を示す顕著な形態変化が確認されました。

2) M1型分化の検討（図2）

• 4日間の併用：マクロファージのCD80とCD86遺伝子発現量が、各単独の場合よりも有意に高くなりました。1日目に対して、同発現量が4-5倍に上昇したことも確認しました。

3) マクロファージから分泌されるサイトカインの検討（図 3）

• 単独：THGP・LPSの両者とも、単独でM1型マクロファージが分泌するIL‑1β、IL‑6の遺伝子発現量が有意に上昇しました。
• 併用： IL‑1β、IL‑6の遺伝子発現量が、単独添加よりもさらに上昇しました。さらに、1日目より4日目の方が、当該サイトカインの量が増強されました。

4) 機能評価

• 異物貪食能（図4）：LPS単独で上昇し、併用だとさらに増強されました。

• 抗腫瘍効果（図5）：4日間の併用で、“don’t‑eat‑me（私を食べないで）”シグナルであるSIRP‑αの発現は併用群で有意に低下（図5-A）しました。B16-F10メラノーマ（がん細胞）に対する細胞傷害活性も顕著に増強されました（図. 5B）。各単独添加時には、抗腫瘍効果は見られませんでした。

5) 10日刺激による総合評価（図6）

• 単独（THGP、LPS）の形態変化：併用時と同等程度に、各単独での形態（樹状突起長、アメーバ様形態）が変化しました。

• 単独の異物貪食能、抗腫瘍活性：併用時と同等程度に到達しました。

4．まとめ

• THGPと低濃度LPSは、各単独の添加でも、10日間の刺激でマクロファージをM1型に分化させ、異物貪食やがん細胞への攻撃活性を維持・増強させました。
• さらに、両者の併用により、当該変化が短期間（4日）で確認されました。
• 両者の作⽤点の違い（THGP：細胞内、LPS：細胞表面）による相乗効果は、免疫療法の新規の治療戦略や予防的サポートの新たなアプローチになり得ます。

※本研究はin vitro試験であり、ヒトでの有効性・安全性については、今後さらなる検証が必要です。

5．本要約における単語の説明

• （注1）LPS
  細菌（グラム陰性菌）外膜のリポ多糖。主にTLR4受容体を介してシグナル伝達を起こし、濃度依存的に反応の強さが変わります。
• （注2）M1マクロファージ
  マクロファージの極性（状態）の一つ。炎症性サイトカイン（例：IL-1β、IL-6）を産生する“攻めのモード”であり、表面マーカーのCD80・CD86が高まります。
  ※対になるM2マクロファージは組織修復にかかわる“おだやか（抗炎症）モード”です。がん環境下では転移促進に関与してしまいます。
• （注3）THGP
  3-(Trihydroxygermyl)propanoic acid（3-トリヒドロキシゲルミル・プロピオン酸）の略。浅井ゲルマニウム研究所の「アサイゲルマニウム（有機ゲルマニウム）」が水に溶解した状態の分子です。
• （注4）RAW264.7
  マウス由来のマクロファージ様細胞株。試験の再現性が高く取り扱いが容易なため、免疫学や薬効評価で標準的に用いられます。